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Schwester

Zur Bestimmung der Blutgruppe sind folgende Geräte erforderlich: zwei Sätze von Standard-Hemaplutinierungsseren I (0), II (A), III (B), Gruppen von zwei verschiedenen Serien und eine Durchstechflasche mit IV-Serum (AB) (in jede Durchstechflasche mit Serum wird eine Pipette für chemische Reinigung gegeben), eine isotonische Natriumchlorid-Durchstechflasche mit einer Pipette, eine saubere, gewaschene, trockene Platte, Objektträger, sterile speerförmige Nadeln zum Einstechen des Fingers, sterile Mullkugeln, Alkohol. Die Bestimmung wird in einem gut beleuchteten Raum bei einer Temperatur von 15 bis 25 ° C durchgeführt

Jede Durchstechflasche mit Standardserum sollte mit einem Passetikett versehen sein, auf dem Blutgruppe, Chargennummer, Titer, Verfallsdatum und Herstellungsort angegeben sind. Ampullen ohne Etikett sind verboten. Standardseren zur Bestimmung der Blutgruppe nach dem ABO-System werden mit einer bestimmten Farbmarkierung hergestellt: I (0) ist farblos, II (A) ist blau, II I (B) ist rot, IV (AB) ist gelb. Die Kennzeichnung erfolgt auf dem Etikett in Form von Farbbalken: Serum I (0) hat keine Streifen, Serum AND (A) - zwei blaue Streifen, Serum III (B) - drei rote Streifen und IV-Serum (AB) - vier gelbe Streifen Farben. Seren bei 4-10 ° C gelagert Das Serum sollte leicht und transparent sein und eine intakte Ampulle aufweisen. Das Vorhandensein von Flocken, Sedimenten und Trübungen sind Anzeichen für eine Ungeeignetheit des Serums. Der Serumtiter muss mindestens 1:32 betragen, die Aktivität ist hoch: Die ersten Anzeichen einer Agglutination sollten nicht später als 30 Sekunden auftreten. Abgelaufene Seren sind nicht mehr verwendbar.

Die Platte ist mit einem Buntstift in 4 Quadrate unterteilt und im Uhrzeigersinn mit den Quadraten I (0), II (A), III (B) bezeichnet. Ein großer Tropfen Serum von zwei Gruppen der Serien I (0), 11 (A), III (B) wird mit einer Pipette in das entsprechende Quadrat der Platte gegeben. Das Fingerpad wird mit Alkohol behandelt und die Haut mit einem Nadelspeer durchstochen. Der erste Blutstropfen wird mit einer Mullkugel entfernt, die nachfolgenden Tropfen in verschiedenen Teilen des Objektträgers werden nacheinander auf die Serumtropfen aufgetragen und gründlich gerührt. Ein Tropfen Blut sollte 5-10 mal weniger sein als ein Tropfen Serum. Dann durch Schütteln der Platte das Blut gründlich mit Serum mischen. Die vorläufigen Ergebnisse werden nach 3 Minuten ausgewertet, wonach ein Tropfen isotonische Natriumchloridlösung zugegeben, erneut durch Schütteln der Platte gemischt und nach 5 Minuten eine endgültige Beurteilung der Agglutinationsreaktion durchgeführt wird (Abb. 37, siehe Spalte Incl.).

Bei einem positiven Isohämagglutinationstest divergieren die Flocken und Kerne der anhaftenden roten Blutkörperchen nicht, wenn eine isotonische Natriumchloridlösung zugesetzt und gerührt wird. Wenn eine negative Reaktion Serumtropfen auf einer Platte transparent, gleichmäßig rosa Farbe sind, enthalten Sie keine Flocken und Körner. Die folgenden 4 Kombinationen von Agglutinationsreaktionen mit Standardseren der Gruppen I (0), II (A), III (B) sind möglich.

1. Alle 3 Seren beider Serien agglutinieren nicht. Blutuntersuchung -

2. Die Isohämagglutinationsreaktion ist negativ mit Serum-P (A) -Gruppen beider Serien und positiv mit Serum-I (0) - und III (B) -Gruppen. Blutuntersuchung -

3. Die Isohämagglutinationsreaktion ist sowohl bei Serum der III (B) -Gruppe als auch bei Serum der I (0) - und Jp (A) -Gruppe negativ. Blutuntersuchung -

4. Serum I (0) -, II (A) -, III (B) -Gruppen ergeben in beiden Reihen eine positive Reaktion. Blut gehört zur IV (AB) -Gruppe. Bevor jedoch eine solche Schlussfolgerung gezogen werden kann, muss mit dem gleichen Verfahren eine Isohämagglutinationsreaktion mit dem Standardserum IV (AB) der Gruppe durchgeführt werden. Ein negativer Isohämagglutinationstest ermöglicht es, das Testblut endgültig der IV (AB) -Gruppe zuzuordnen.

Die Identifizierung anderer Kombinationen zeigt die falsche Bestimmung der Blutgruppe des Patienten an.

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Blutgruppenbestimmung mit Standardseren

✓ Artikel von einem Arzt überprüft

In unserer Zeit hat die Medizin große Höhen erreicht. Ärzte sind in der Lage, lange Operationen durchzuführen und Menschen vor den scheinbar hoffnungslosesten Überlebenssituationen zu retten. In solchen Fällen muss man sich jedoch mit dem Problem der Notwendigkeit einer Bluttransfusion auseinandersetzen. Dies war lange Zeit nicht realisierbar, da die Patienten sehr schnell verstarben. Dieses Problem wurde jedoch durch die Entdeckung des Konzepts der Blutgruppen bzw. des Nachweises von Antigenen auf Erythrozyten und damit von Antikörpern im Blutplasma gelöst.

Blutgruppenbestimmung mit Standardseren

Was ist die Blutgruppe?

Zu Beginn des 20. Jahrhunderts entdeckte ein australischer Arzt, der nebenberufliche Wissenschaftler K. Landsteiner, das Vorhandensein von Antigenen und Antikörpern im Blut. Antigene befinden sich auf der Oberfläche der roten Blutkörperchen. Sie sind 2 Arten. Der Einfachheit halber haben Biologen sie als A und B bezeichnet. Antikörper sind wiederum im Blutplasma enthalten und haben die Namen α und β erhalten. Wenn A mit α und B mit β verbunden ist, beginnt der Blutgerinnungsprozess. Diese Reaktion wird als Hämagglutination bezeichnet.

So können Sie aus den verfügbaren Antigen- und Antikörpersätzen 4 Arten von Blut herstellen, die in der folgenden Tabelle aufgeführt sind:

Blutgruppe und Charakter

Es ist wichtig! Je nachdem, welche Art von Spenderblut für die Transfusion bereitgestellt wird, ist das Blut des Patienten entweder geronnen oder nicht. Der erste Fall ist tödlich.

Reaktionsserum

Derzeit gibt es eine Reihe von Möglichkeiten, die Blutgruppe zu bestimmen. Die meisten von ihnen sind jedoch für die Analyse in großen Labors konzipiert. Selbst wenn Sie sich in einem kleinen Dorf oder an einem Ort befinden, an dem Sie solche Einrichtungen nicht aufsuchen können, bleibt die Möglichkeit bestehen, eine Blutgruppennummer zu identifizieren.

Für die Blutgruppenbestimmung werden vier spezielle Standardseren verwendet, die aus menschlichem Blut hergestellt werden. Sie sind entweder in Flaschen oder in Ampullen von 2-5 ml erhältlich und entsprechen verschiedenen Blutgruppen:

  1. 0. Erhältlich mit weißem Etikett und transparenter Farbe.
  2. A. Flüssigblaue Farbe. Auf die Flasche werden zwei blaue Streifen aufgebracht.
  3. B. Flüssige blassrosa Farbe. Auf der Flasche befinden sich drei gleichfarbige Bänder.
  4. AB. Flüssige gelbe Farbe. Auf eine Flasche werden 4 gleichfarbige Streifen gelegt.

Serum zur Durchführung der Reaktion auf die Blutgruppe

Es ist wichtig! In der Tat haben diese Reagenzien bei der Herstellung keine Farbe. Sie sind absichtlich bemalt, so dass es unmöglich ist, sie zu verwechseln, wenn Sie sie verwenden.

Auch auf Etiketten sind aufgebracht:

  • Titer;
  • Herstellungsdatum;
  • Verfallsdatum;
  • Angaben zum Hersteller;
  • Seriennummer.

Wie wird die Blutgruppe bestimmt?

Zur Bestimmung der Blutgruppe benötigen Sie:

  • flache Platte mit 8 Nuten;
  • Glasstifte oder Pipetten - 8 Stück;
  • 2 Sätze von Seren verschiedener Serien, um die Möglichkeit von Fehlern auszuschließen;
  • Normal oder Sanduhr.

Hilfsmittel zur Bestimmung von Blutstandardseren

Seren werden in 2 Reihen auf einen flachen Teller gelegt, wonach Glasstäbchen entnommen werden. Mit ihrer Hilfe wird das Testblut in die Reihen eingeführt. Mit diesen Stäbchen wird gerührt, woraufhin der Teller zu rütteln beginnt. Wenn Sie Glück haben, kann der Prozess in 10 bis 30 Sekunden verfolgt werden, es ist jedoch besser, dies bis zu 5 Minuten zu tun, um die Möglichkeit einer Reaktionshemmung auszuschließen. Dann folgt die Untersuchung und Interpretation der Ergebnisse.

Achtung! Zuallererst ist auf die Kreise zu achten, in die das Serum der Blutgruppen II und III gegossen wurde. Von Interesse ist das Vorhandensein kleiner Flocken, die als Ergebnis der Agglutination - Verklumpung roter Blutkörperchen - auftreten.

  1. Wenn weder in II noch in III Flocken vorhanden sind und auch mit dem zusätzlichen Nachweis weder I noch IV geronnen sind, liegt die erste Blutgruppe vor.
  2. Wird dadurch überall außer in der Serumgruppe II eine Gerinnung festgestellt, so gehört das zu untersuchende Blut zur zweiten Gruppe.
  3. Wird in allen Proben außer im Serum der Gruppe III eine Gerinnung beobachtet, so gehört das Testblut zur selben Gruppe.
  4. Wenn die Faltung in allen Proben mit Ausnahme der Serum IV-Gruppe stattgefunden hat, bedeutet dies, dass dieselbe Blutgruppe analysiert wurde.

Blutgruppe

Wichtig! Genau genommen kann die Blutgruppe mit nur 2 und 3 Blutgruppen bestimmt werden. Aus dem Wesen der Methode kann jedoch geschlossen werden, dass der menschliche Faktor einen großen Einfluss hat. Aus diesem Grund werden die Serum I- und IV-Blutgruppen als zusätzliche Kontrolle verwendet.

Nach dem Eingriff sollte das verwendete Geschirr gut mit warmem Wasser gewaschen und getrocknet werden. Dann kann es für die weitere Forschung verwendet werden.

Ungenaue Ergebnisse und deren Ursachen

Manchmal kommt es vor, dass Klumpen von zusammenklebenden roten Blutkörperchen nicht deutlich sichtbar sind. Während des Tests kann häufig eine isotonische Natriumchloridlösung zugesetzt werden. Es verhindert die Möglichkeit einer falschen Verklebung, wodurch die Flocken, die nicht durch den Koagulationsprozess entstanden sind, zurückfallen.

Es ist wichtig! Wenn das Ergebnis der Analyse nicht klar erkennbar ist, muss es erneut erstellt und mit einem Mikroskop auf kleine Agglutination untersucht werden.

Bei einem eindeutig identifizierten Ergebnis können Sie dem Patienten sofort seine Blutgruppe nennen. Andernfalls sollten Sie auf andere Analysemethoden verweisen.

Vergessen Sie nicht die Möglichkeit von Fehlern, die normalerweise aus den folgenden Gründen auftreten:

  • Verwendung von überfälligem oder schwachem Serum;
  • Verwendung von zu viel Blut im Verhältnis zum Serumvolumen;
  • Die Reaktion wird viel länger durchgeführt, als es die Vorschriften vorschreiben.
  • Umgebungstemperatur entspricht nicht dem Normalwert, so dass eine kalte Agglutination der Erythrozyten auftritt.

Die häufigsten Fehlerursachen bei der Bestimmung von Blutgruppen

Zusätzlich ist anzumerken, dass beim Trocknen entlang der Ränder des Gemisches aus Serum und Testblut die Bildung von Körnern möglich ist, die nicht als Indikatoren der Reaktion dienen können.

Das Ergebnis in die Praxis umsetzen

Wie bereits erwähnt, wird die Bestimmung der Blutgruppe durchgeführt, um einen tödlichen Ausgang während der Transfusion auszuschließen. Im Idealfall muss der blutempfangende Patient - der Empfänger - mit dem Blut der gleichen Gruppe wie er selbst transfundiert werden. Dies ist jedoch nicht immer der Fall. Schon allein deshalb, weil die überwiegende Zahl der Menschen mit der ersten Blutgruppe 50% beträgt. Gleichzeitig sind sie universelle Spender, da ihnen Agglutinogene fehlen, die die Blutgerinnung stimulieren.

Achtung! Patienten mit intravenöser Blutgruppe können als universelle Empfänger bezeichnet werden, da ihr Körper Blut jeder Gruppe aufnehmen kann. Gleichzeitig kann ihr Blut nicht an Mitglieder einer anderen Gruppe übertragen werden.

Der Übersichtlichkeit halber geben die Kompatibilitäten von Spendern und Empfängern eine Tabelle:

Algorithmus 6 Bestimmung der Blutgruppe mit Standardseren

Blutgruppenbestimmung unter Verwendung von gepaarten Standard-Isohämagglutinationsseren.

1 Einleitung: Wir führen eine Blutgruppenbestimmung mit Standardseren in einem Behandlungsraum nach ärztlicher Vorschrift durch. Ich trage eine Mütze, eine Brille, eine Maske, ein Kleid, eine Schürze und Handschuhe. Hände werden hygienisch vorbehandelt.

Standard Serum Two Series

Testen Sie das Blut in vitro

Platte zur Bestimmung der Blutgruppe.

Vier sterile Glasstäbe (in einem Glas, Petrischale)

Isotonische Natriumchloridlösung (Reagenzglas)

Sterile Pipetten 2 Stck.

Kapazität mit 3% iger Chloraminlösung.

3 Manipulation durchführen

Einen Tropfen (0,1 ml) Standardserum in die einzelnen Vertiefungen geben.

Geben Sie einen großen Blutstropfen in der Nähe des Lochs der 4. Gruppe in einem Abstand von mindestens 1 cm auf die Platte.

Trennen Sie die Enden der Glasstifte, um Blut im Serum (Verhältnis 10: 1) zu bilden, mischen Sie

Schütteln Sie die Schale 5 Minuten lang und beobachten Sie die Agglutination.

In die Vertiefungen, in denen eine Agglutination auftrat, wird Kochsalzlösung (0,1 ml) gegeben.

Die Platte wackeln, die Agglutination beobachten.

Bei der Bestimmung der Blutgruppe mit Standardseren

In keiner der Vertiefungen - der ersten Gruppe - wird eine Agglutination beobachtet

In der ersten und dritten Vertiefung - der zweiten Gruppe - wird eine Agglutination beobachtet

Eine Agglutination wird in der ersten und zweiten Vertiefung beobachtet - der dritten Gruppe

Eine Agglutination wird in allen Vertiefungen beobachtet - wahrscheinlich in der vierten Gruppe

Bestimmen Sie das Ergebnis mit dem Serum der vierten Gruppe (ähnlich)

Es gibt keine Agglutination mit Serum der vierten Gruppe - der vierten Gruppe

Bei Serum der vierten Gruppe wird keine Agglutination beobachtet - es ist unmöglich, die Blutgruppe zu bestimmen, es ist notwendig, das Serum zu ersetzen.

Nach der Manipulation werden alle mit Blut kontaminierten Gegenstände eine Stunde lang in einer dreiprozentigen Chloraminlösung eingeweicht.

4 Mögliche Fehler:

Verwenden Sie keinen Arztschutz.

Sticks wiederverwenden.

Tragen Sie Stöcke, die mit Blut in Berührung gekommen sind, mit sauberen Stöcken über dem Tablett.

Nicht konsistentes Agglutinationsmuster mit Abschluss der Gruppenzugehörigkeit.

Nicht desinfizierte blutverseuchte Gegenstände.

Nicht grobe Fehler:

Agglutinationswartezeit weniger als 5 min.

Den Vertiefungen, in denen eine Agglutination auftrat, wurde keine Kochsalzlösung zugesetzt.

Halten Sie die Stäbchen an den Enden und nicht in der Mitte.

5 Bewertungskriterien:

Hat übergeben - das Fehlen von groben Fehlern, das Vorhandensein von nicht mehr als zwei nicht groben Fehlern.

Nicht bestanden - das Vorhandensein von groben Fehlern, das Vorhandensein von mehr als zwei nicht groben Fehlern.

Wenn der Lehrer einen Fehler macht, kann er ihn bitten, die entsprechende Manipulationsstufe zu wiederholen. Wenn der Fehler wiederholt - nicht bestanden. Erlaubt nicht mehr als eine Wiederholung.

Methoden zur Bestimmung der Blutgruppe

In der modernen Medizin kennzeichnet die Blutgruppe eine Reihe von Antigenen, die sich auf der Oberfläche der roten Blutkörperchen befinden und deren Spezifität bestimmen. Es gibt eine große Anzahl solcher Antigene (üblicherweise wird eine Tabelle mit Blutgruppen mit verschiedenen Antigenen verwendet), die Bestimmung der Blutgruppen erfolgt jedoch überall mit Hilfe der Systemklassifikation Rh-Faktor und AB0.

Die Definition einer Gruppe ist ein obligatorisches Verfahren zur Vorbereitung einer Operation. Eine solche Analyse ist auch erforderlich, wenn man in einigen Kontingenten, einschließlich des Militärs, Angestellter interner Organe und Machtstrukturen, in den Dienst tritt. Diese Veranstaltung wird aufgrund des erhöhten Risikos eines Zustands durchgeführt, der das Leben einer Person bedroht, um die Zeit zu verkürzen, die für die Unterstützung in Form von Bluttransfusionen erforderlich ist.

Zusammensetzung des Blutes verschiedener Blutgruppen

Die Essenz des AB0-Systems ist das Vorhandensein von Antigenstrukturen auf den Erythrozyten. Im Plasma gibt es keine entsprechenden Antikörper (Gammaglobuline). Daher können Sie für die Untersuchung von Blut die Reaktion "Antigen + Antikörper" verwenden.

Rote Blutkörperchen werden zum Zeitpunkt des Zusammentreffens von Antigen und Antikörpern zusammengeklebt. Diese Reaktion wird als Hämagglutination bezeichnet. Die Reaktion wird während der Analyse als kleine Flocken angezeigt. Die Studie basiert auf der bildgebenden Agglutination mit Seren.

Erythrozyten- "A" -Antigene sind mit den Antikörpern "ά" bzw. "B" mit "β" assoziiert.

Folgende Blutgruppen zeichnen sich durch ihre Zusammensetzung aus:

  • I (0) - ά, β - die Oberfläche der Erythrozyten enthält überhaupt keine Antigene;
  • II (A) - β - auf der Oberfläche befindet sich Antigen A und Antikörper β;
  • III (B) - ά - die Oberfläche enthält B mit einem Antikörper vom Typ ά;
  • IV (AB) - 00 - Die Oberfläche enthält beide Antigene, jedoch keine Antikörper.

Der Embryo hat Antigene, die sich bereits im Embryo-Zustand befinden, und Agglutinine (Antikörper) treten im ersten Lebensmonat auf.

Bestimmungsmethoden

Standardmethode

Es gibt viele Techniken, aber im Labor wird normalerweise die Bestimmung mit Standardseren durchgeführt.

Die Standard-Serummethode wird verwendet, um die Arten von AB0-Antigenen zu bestimmen. Die Zusammensetzung eines isohämagglutinierenden Standardserums enthält eine Reihe von Antikörpern gegen Erythrozytenmoleküle. Bei Vorhandensein eines Antigens, das Antikörpern ausgesetzt ist, wird ein Antigen-Antikörper-Komplex gebildet, der eine Kaskade von Immunreaktionen auslöst.

Das Ergebnis dieser Reaktion ist die Agglutination von Erythrozyten. Aufgrund der Art der auftretenden Agglutination ist es möglich, die Identität der Probe für jede Gruppe zu bestimmen.

Zur Herstellung von Standardserum werden Spenderblut und ein spezifisches System durch Plasmaextraktion, einschließlich Antikörper, und dessen anschließende Verdünnung verwendet. Die Verdünnung erfolgt mit isotonischer Natriumchloridlösung.

Zucht ist wie folgt:

  1. In ein Reagenzglas mit 1 ml einer 0,9% igen essbaren Salzlösung muss 1 ml Plasma gegeben werden. Rühre die Lösung gründlich um.
  2. Dann wird die resultierende Plasmalösung in einem Volumen von 1 ml pipettiert. Gib es in das Röhrchen, das die isotonische Lösung enthält. Es ist also notwendig, eine Plasmaverdünnung im Verhältnis 1 zu 256 zu erreichen. Die Verwendung anderer Verdünnungen birgt das Risiko eines Diagnosefehlers.

Die direkte Forschung wird folgendermaßen durchgeführt:

  1. Auf eine spezielle Tablette wird tropfenweise von jedem Serum (Gesamtvolumen ca. 0,1 Milliliter) auf die Stelle getropft, an der sich eine entsprechende Markierung befindet (2 Proben werden verwendet, eine davon ist die Kontrolle, die zweite ist für Forschungszwecke bestimmt).
  2. Legen Sie dann neben jeden Tropfen Serum die Testprobe in ein Volumen von 0,01 Milliliter, wonach sie mit jedem Diagnostikum separat gemischt wird.

Ergebnisdecodierungsregeln

Nach fünf Minuten können Sie die Ergebnisse der Studie auswerten. In großen Serumtropfen kommt es zu einer Aufklärung, in einigen zu einer Agglutinationsreaktion (es bilden sich kleine Flocken), in anderen nicht.

Video: Bestimmung von Blutgruppe und Rh-Faktor

Hier sind mögliche Optionen:

  • Wenn die Agglutinationsreaktion nicht in beiden Proben mit den Seren II und III (+ Kontrolle 1 und IV) auftritt - die Definition der ersten Gruppe;
  • Wird in allen Proben mit Ausnahme von II eine Koagulation beobachtet, ist die Definition der zweiten Probe;
  • In Abwesenheit einer Agglutinationsreaktion nur in der Probe der Gruppe III - Definition III;
  • Wenn in allen Proben, einschließlich der IV-Kontrolle, eine Gerinnungsfähigkeit beobachtet wird, lautet die Definition IV.

Wenn die Seren in der richtigen Reihenfolge angeordnet sind und sich Signaturen auf der Platte befinden, ist die Navigation einfach: Die Gruppe entspricht Orten ohne Agglutination.

In einigen Fällen ist die Bindung unklar. Dann muss die Analyse wiederholt werden, eine kleine Agglutination wird unter einem Mikroskop beobachtet.

Kreuzreaktionsmethode

Die Essenz dieser Technik ist die Bestimmung von Agglutinogenen unter Verwendung von Standardseren oder Zyklonen mit der parallelen Bestimmung von Agglutininen unter Verwendung von Referenz-Erythrozyten.

Das Kreuzanalyseverfahren unterscheidet sich praktisch nicht vom Serumtest, es gibt jedoch einige Ergänzungen.

Auf die Tablette unter den Seren müssen Sie einen Tropfen normaler roter Blutkörperchen geben. Dann wird aus dem Röhrchen mit dem Patientenblut, das die Zentrifuge passiert hat, das Plasma mit einer Pipette entnommen, die auf die Standard-Erythrozyten aufgesetzt wird, die auf dem Boden platziert sind, und zum Standardserum gegeben.

Neben der Technik des Standardverfahrens werden die Ergebnisse der Studie einige Minuten nach Beginn der Reaktion bewertet. Bei einer Agglutinationsreaktion kann man von ABg-Agglutininen sprechen, bei einer Plasmareaktion kann man Agglutinogene beurteilen.

Die Ergebnisse von Bluttests unter Verwendung von Standard-Erythrozyten und -Seren:

Bestimmung der Blutgruppe und des Rh-Faktors

Die Definition von Blutgruppe und Rh-Faktor erfolgt auf zwei Arten:

  1. Primärbestimmung von Blutgruppe und Rh-Faktor (Anti-A, Anti-B und Anti-D)
  2. Sekundärdiagnose der Blutgruppe und des Rh-Faktors (Standardserum und Kreuzmethode, Phänotypbestimmung, d. h. C-, C-, E-, C-, C-, K-, K-Antigene)

Bei der Expressdiagnose (primäre Bestimmung der Blutgruppe und des Rh-Faktors) werden Kell-Antigene und andere Verifizierungssysteme nicht berücksichtigt. Daher werden die Zyklone nur zur primären Bestimmung der Blutgruppe und des Rh-Faktors sowie im Notfall für Hinweise auf eine Transfusion von Blutbestandteilen verwendet.

Weitere Informationen zur seltensten Blutgruppe der Welt finden Sie hier.

Bestimmung von Blutgruppe und Rh-Faktor durch Anti-A-, Anti-B- und Anti-D-Polyklone nach dem AB0-System und dem Rhesus-System

Die Bestimmung der Blutgruppe und des Rh-Faktors durch Anti-A-, Anti-B- und Anti-D-Superzyklone ist die modernste und relativ einfache Methode. Zur Bestimmung der Blutgruppe werden die Zyklone verwendet, d.h. monoklonale Antikörper.

Was ist erforderlich, um die Blutgruppe und den Rh-Faktor zu bestimmen?

- Anti-A-Coliclon;

- Anti-B-Coliklon;

- Anti-D-Coliclon;

- 0,9% ige Natriumchloridlösung; spezielle Tablette; sterile Stäbchen.

Algorithmus und Reihenfolge der Blutgruppenbestimmung

Tragen Sie Anti-A-, Anti-B-Zyklone auf eine spezielle Tablette in einem großen Tropfen (0,1 ml) unter den entsprechenden Aufschriften auf.

Daneben tropft man das Testblut (0,01–0,03 ml) in einem kleinen Tropfen. Rühren Sie sie und beobachten Sie den Beginn oder das Fehlen einer Agglutinationsreaktion für 3 Minuten. Wenn das Ergebnis fraglich ist, fügen Sie 1 Tropfen 0,9% iger Kochsalzlösung hinzu.

Entschlüsselung der Ergebnisse der Blutgruppenbestimmung

  • trat die Agglutinationsreaktion mit einem Anti-A-Zyklon auf, so gehört das zu testende Blut zur Gruppe A (II);
  • trat die Agglutinationsreaktion mit einem Anti-B-Zyklon auf, so gehört das zu testende Blut zur Gruppe B (III);
  • Wenn der Agglutinationstest nicht mit Anti-A- und Anti-B-Polyklonen durchgeführt wurde, gehört das Testblut zur Gruppe 0 (I).
  • Wenn die Agglutinationsreaktion mit Anti-A- und Anti-B-Polyklonen auftrat, dann gehört das Testblut zur AB (IV) -Gruppe, wie in der Abbildung gezeigt.
Bestimmung des Rh-Faktors durch Anti-D-Ziklonon

Mischen Sie auf der Tablette einen großen Tropfen (0,1 ml) Anti-D eines Zyklons und einen kleinen Tropfen (0,01 ml) des Testbluts des Patienten. Das Einsetzen der Agglutinationsreaktion oder ihre Abwesenheit wird 3 Minuten lang überwacht.

  • Wenn die Agglutinationsreaktion mit einem Anti-D-Zyklon auftrat, ist das zu testende Blut Rh-positiv (Rh +)
  • Wenn der Agglutinationstest mit dem Anti-D-Zyklon nicht durchgeführt wurde, gehört das zu testende Blut zu Rh-negativ (Rh -)

Mit anderen Worten, wenn Anti-D mit einem Rh-positiven roten Blutkörperchen gemischt wird, tritt die Agglutinationsreaktion auf, und wenn das Blut Rh-negativ ist - gibt es keine Agglutination (wie in der Abbildung gezeigt - ist die vierte Blutgruppe Rh-negativ).

Bestimmung der Blutgruppe mit Standardseren

Blutgruppierung mit isohämagglutinierenden Standardseren - Suche und Nachweis von Antigenen A und B im Blut mittels einer Agglutinationsreaktion. Um das Ziel zu erreichen, verwenden Sie:

  • Standard-Isohämagglutinations-Seren der Blutgruppen O (I) sind farblos, A (II) ist blau, B (III) ist rot, AB (IV) ist gelb.
  • Weiße Platten, markiert mit Blutgruppen: 0 (I), A (II), B (III), AB (IV).
  • NaCl 0,9%
  • Glasstäbe

Die Methode zur Bestimmung der Blutgruppen-Standardseren

Die Methode zur Bestimmung der Blutgruppen-Standardseren

  1. Unterschreiben Sie das Schild (vollständiger Name des Patienten);
  2. Tragen Sie die Bezeichnungen von zwei Serien von Standardseren I, II und III in einem Volumen von 0,1 ml auf und bilden Sie zwei Reihen mit drei Tropfen von links nach rechts: 0 (I), A (II), B (III);
  3. Nehmen Sie Blut aus einer Vene. Übertragen Sie sechs Tropfen des Testbluts des Patienten mit einem Glasstab auf eine Platte mit sechs Punkten neben einem Tropfen Standardserum und mischen Sie.

Die Agglutination beginnt in 30 Sekunden. Geben Sie in den Tropfen, in denen eine Agglutination auftrat, jeweils einen Tropfen 0,9% NaCl hinzu und bewerten Sie das Ergebnis.

Auswertung der Ergebnisse der Bestimmung von Blutgruppen-Standardseren

Eine positive Agglutinationsreaktion kann sandig oder schuppig sein. Bei einer negativen Reaktion bleibt der Tropfen gleichmäßig rot. Die Ergebnisse der Reaktionen in Tröpfchen mit Seren der gleichen Gruppe (zwei Serien) müssen übereinstimmen. Die Zugehörigkeit des Testbluts zur entsprechenden Gruppe wird durch das Vorhandensein oder Nichtvorhandensein von Agglutination durch Reaktion mit den entsprechenden Seren nach 5-minütiger Beobachtung bestimmt. Es sollte beachtet werden, dass, wenn die Seren aller drei Gruppen eine positive Reaktion zeigten, dies darauf hinweist, dass das Testblut beide Agglutinogene (A und B) enthält und zur AB (IV) -Gruppe gehört. In solchen Fällen ist es jedoch erforderlich, um eine unspezifische Agglutinationsreaktion auszuschließen, eine zusätzliche Kontrolluntersuchung des Testbluts mit Standard-Isohämagglutinationsserum der AB (IV) -Gruppe durchzuführen, das keine Agglutinine enthält. Nur das Fehlen einer Agglutination in diesem Tropfen in Gegenwart einer Agglutination in Tropfen, die Standardseren der Gruppen 0 (I), A (II) und B (III) enthalten, ermöglicht es, die spezifische Reaktion zu betrachten und das Blut der Gruppe AB (IV) zuzuordnen.

Bestimmung der Blutgruppe nach der Kreuzmethode

Kreuzblutgruppierung ist der Nachweis der Anwesenheit oder Abwesenheit von Antigenen A und B im zu testenden Blut unter Verwendung von isohämagglutinierenden Standardseren und α- und β-Antikörpern unter Verwendung von roten Standardblutkörperchen. Die Umsetzung mit Standardseren erfolgt wie oben beschrieben.

Die Methode zur Bestimmung der Blutgruppen-Kreuzmethode

Reaktion mit normalen roten Blutkörperchen

Für die Reaktion mit Standard-Erythrozyten sind Standard-Erythrozyten mit drei Blutgruppen erforderlich: 0 (I), A (II), B (III).

Methoden zur Durchführung der Reaktion mit normalen roten Blutkörperchen

  1. Das zu untersuchende Blut wird aus einer Vene in ein Reagenzglas entnommen, zentrifugiert oder 30 Minuten stehen gelassen, um Serum zu erhalten.
  2. Auf die beschriftete Platte werden drei große Tropfen (0,1 ml) Blutserum aus einem Reagenzglas und daneben ein kleiner Tropfen (0,01 ml) Standard-Erythrozyten von Gruppen aufgetragen.
  3. Die entsprechenden Tropfen werden mit Glasstiften vermischt, die Platte geschüttelt, 5 Minuten beobachtet, 0,9% NaCl zu Tropfen unter Verklebung gegeben und das Ergebnis ausgewertet.

Auswertung der Ergebnisse der Reaktion mit normalen roten Blutkörperchen

Die mit Standard-Isohämagglutinationsseren und Standard-Erythrozyten erhaltenen Ergebnisse auswerten. Die Besonderheiten der Ergebnisse der Reaktion mit Standard-Erythrozyten - Erythrozyten der Gruppe 0 (I) gelten als Kontrollen. Das Ergebnis der Überkreuzungsmethode wird als zuverlässig angesehen, wenn bei der Reaktion mit Standard-Isohämagglutinationsseren und mit Standard-Erythrozyten die Antworten über die Gruppe des untersuchten Blutes übereinstimmen. Geschieht dies nicht, sollten beide Reaktionen wiederholt werden.

Bestimmung der Blutgruppe und des Rh-Faktors nach der Methode der Standardseren

Das ABO-System ist die weltweit häufigste Klassifikation von menschlichem Blut. Die Grundlage der Einteilung des Blutes in 4 Gruppen ist das Prinzip der Wechselwirkung von Antigenen und Antikörpern. In den Erythrozyten (roten Körpern) der menschlichen biologischen Flüssigkeit können sich 2 Agglutinogene befinden - A und B, und in Plasma 2 Arten von Agglutinin - Anti-A und Anti-B. Ihre Kombination ist das Zeichen, mit dem die Gruppe bestimmt wird - 0, A, B oder AB, 1, 2, 3 oder 4. Die Bestimmung von Blutgruppen aus Antigene enthaltenden Standardseren ist eine einfache und schnelle Reaktion.

Das Wesen der Methode

Die Gruppe wird unter Verwendung von Isohämagglutinierungsmitteln - Laborreagenzien bestimmt. Die Studie wird durchgeführt, wenn das Reagenz mit nativem Blut und unter Zugabe von Natriumchloridlösung (0,9%) gemischt wird.

Während der Studie wird untersucht, welche Antikörper (Antigene) im Nativen vorhanden sind und welche nicht. Somit wird bestimmt, welches Blut 0, A, B oder AB ist.

Jede Gruppe verfügt über einen eigenen Satz von Agglutinogenen (Antigenen) und Agglutininen (Antikörpern):

  • 1 (oder Null) - Antikörper A und Antikörper B befinden sich auf der Oberfläche der roten Blutkörperchen, in diesem Fall fehlen Antikörper vollständig im Serum. Daher tritt die Agglutinationsreaktion nicht auf.
  • 2 - Es gibt Agglutinin B im Blut (Antikörper), Agglutinogen (Antigen) A.
  • 3 - es gibt ein Antigen B und einen Antikörper A.
  • 4 - beide Proteine ​​sind vorhanden (2 Antikörper) und es gibt kein einziges Antigen. Es ist am wenigsten verbreitet - etwa 8% der Bevölkerung.

Die Bestimmung der Blutgruppe durch Standardseren ist notwendig, damit die Agglutination während der Transfusion nicht zum tödlichen Ausgang der Person führt, die sich einer Bluttransfusion unterzogen hat. Eine Agglutinationsreaktion, d. H. Ein Kleben, tritt auf, wenn das Serum in die nativen roten Blutkörperchen eintritt und der Prozess der Zerstörung dieser Körper beginnt.

Die Zellen werden während der Wechselwirkung von Antigen A und Antikörper A zusammenkleben. Und während der Wechselwirkung von Antigen B und Antikörper B. Beim Agglutinieren erscheinen in der Probe immer Flocken - rote Blutkörperchen, die zusammengeklebt sind.

Serum herstellen

Aus dem Plasma eines menschlichen Spenders wird im Labor Serum zur Bestimmung der Blutgruppe hergestellt. Sind in der Herstellung dieser Reagenzien in den Punkten der Transfusion beschäftigt. Die Proben werden in verschlossenen Flaschen bei einer bestimmten Temperatur gelagert und transportiert. Im Serum zur Bestimmung der Gruppe befinden sich α- und β-Hämagglutinine. Der Kolben gibt die Konzentration dieser Proteine, den Zeitraum und die Lagertemperatur an.

Forschung betreiben

Die Studie wird 2 mal durchgeführt. Zuerst auf einfache Weise, unmittelbar nach der Entnahme, dann nach der Kreuzreaktionsmethode in einem desinfizierten Labor. Es gibt mehrere Reaktionsbedingungen. Es ist möglich, die Blutgruppe mit Standardseren zu bestimmen, sofern deren Haltbarkeit noch nicht abgelaufen ist und der Titer (die Konzentration) des Reagens mindestens 1:32 beträgt. Es ist wichtig, die Raumtemperatur auf + 15... + 25 º C zu halten.

Der Ablauf der Analyse ist wie folgt:

  1. Zeichnen Sie auf einem Teller und einer Plastiktafel die Nummern der Gruppen in der Nähe der Aussparungen.
  2. Proben von jedem Serum werden in die Vertiefungen in der Platte gegeben (1 oder 2 Tropfen).
  3. Eine Pipette wird durch einen Tropfen Eigenblut des Patienten gemessen, neben die Seren gelegt und mehrmals gerührt.
  4. In jede Probe wird eine isotonische Natriumchloridlösung getropft.
  5. Verwenden Sie zusätzlich Serum AB.

Nach 5 Minuten sind die Ergebnisse sichtbar. Führen Sie aus Gründen der Genauigkeit eine Analyse mit Reagenzien 2 verschiedener Freisetzungsreihen durch. Es kommt vor, dass die Agglutinationsreaktion schlecht ist, dann wird sie durch ein Mikroskop beobachtet.

Der Test muss unbedingt prüfen, ob der Rh-Faktor positiv oder negativ ist. Rhesus ist ein Protein, das in einem großen Prozentsatz der Bevölkerung auf der Oberfläche roter Blutkörperchen vorhanden ist. Wenn ja, ist Rh positiv. Wenn es kein Protein gibt, ist es fixiert. Der Rhesusfaktor wird mit Plasma und speziellem Anti-D-Serum bestimmt.

Das Vorhandensein von Rhesus wird auf die gleiche Weise wie bei der Bestimmung der Entladung des ABO-Systems überprüft - durch Beobachtung der Klebereaktion.

Testergebnisse

Die erste Studie liefert Ergebnisse in 3-5 Minuten. Eine einfache Methode mit Standardseren bietet 4 Möglichkeiten:

  1. In beiden Proben mit Seren von 2 und 3 Gruppen findet keine Agglutination statt. Das Ergebnis legt nahe, dass einheimisches Blut zur ersten Kategorie gehört.
  2. Reduzieren Sie in allen Beispielen außer dem, der Nummer 2 ist. Die zweite Gruppe.
  3. Agglutination wird in Probe Nr. 3 nachgewiesen, in den anderen nicht. Gruppe entspricht 3.
  4. Gerinnbarkeit in allen, einschließlich AB-Serum. Gruppe 4.

Die Bestimmung der Blutgruppe mit Standardseren ist in jeder medizinischen Einrichtung möglich, da diese Prozedur unmittelbar nach der Blutentnahme von einer prozeduralen Krankenschwester durchgeführt werden kann.

Kreuzreaktionsmethode und Zyklon-Methode

Durch die Methode der einfachen Reaktion wird die Gruppe unter Verwendung von Laborserum hergestellt. Die zweite Methode - die Methode der Kreuzreaktionen - wird von einem Laborassistenten durchgeführt. Zur Verwendung mit normalen roten Blutkörperchen und dem Plasma des Patienten. Es wird abgebaut, wenn schwere Zellen während der Zentrifugation vom Plasma getrennt werden.

Zur Überprüfung werden nach dem Zentrifugieren 2 Tropfen Serum benötigt und mindestens 1,5 Stunden lang aufgeschlämmt. Geben Sie 2 Tropfen des extrahierten biologischen Materials in eine Labortablette und geben Sie einen Tropfen mit normalen roten Blutkörperchen hinzu. Blutkörperchen mit Agglutinogenen der Gruppe 2 werden in den ersten Plasmatropfen und in die zweite Probe gegeben - mit den dritten Antigenen.

Die Methode der Kreuzreaktion gilt als die Kontrolle und zuverlässiger. Die Reaktion mit roten Blutkörperchen wird wie folgt bewertet:

  • Es findet eine Agglutination in 1 und 2 Tropfen statt. Dieses Blut wird als 0 oder 1 bezeichnet.
  • In beiden Fällen erfolgt keine Reaktion - dies ist 4.
  • Die Klebereaktion, bei der die Erythrozyten der zweiten Kategorie zugesetzt wurden, ist 2. Und entsprechend die 3. Gruppe, bei der die Kontroll-Erythrozyten der dritten Variante.

Die Methode der Kolonie

Die ABO-Systemgruppe kann auch mit Hilfe eines Zyklons installiert werden. Diese Reagenzien werden mit Hilfe gentechnischer Errungenschaften aus dem Blut von Labormäusen hergestellt. Hier verwenden sie monoklonale Antikörper, die aus nur einer Antikörper-bildenden Zelle hergestellt wurden.

Blutgruppenoptionen

Blut hat spezielle immunogene Eigenschaften, mit denen sich alle Menschen in bestimmte Gruppen einteilen lassen. Jeder Mensch muss wissen, zu welcher Blutgruppe er gehört. Dies kann bei der Bereitstellung einer medizinischen Notfallversorgung erforderlich sein, wenn eine zuverlässige Bestimmung der Blutgruppe aus irgendeinem Grund nicht möglich ist. Forscher haben den Zusammenhang zwischen Blutgruppen und Krankheiten bestätigt. Nachdem eine Person ihre Blutgruppe bestimmt hat, kann sie die Besonderheiten ihrer Gesundheit herausfinden und Krankheiten rechtzeitig vorbeugen.

Das AB0-Gruppensystem wurde 1900 von Landsteiner für die Welt geöffnet. Später wurden andere Unterschiede im Blut von Menschen und Tieren (zum Beispiel der Rh-Faktor) untersucht.

Die Zugehörigkeit zu einer Blutgruppe ist im genetischen Code festgelegt und wird mit anderen individuellen Merkmalen vererbt. Die Bildung der antigenen Zusammensetzung des Blutes erfolgt in der vorgeburtlichen Phase und verändert seine spezifischen Eigenschaften während des gesamten Lebens einer Person nicht.

Elemente des Blutsystems

Zelluläre Elemente sind gleichmäßig im flüssigen mobilen Blutplasma verteilt: rote Blutkörperchen, weiße Blutkörperchen und Blutplättchen. Einheitliche Elemente machen bis zu 35-45% des gesamten Blutvolumens aus. Darüber hinaus befinden sich im Plasma Fettpartikel von Zellen, der sogenannte "Blutstaub" (Hämoconium). Rote Blutkörperchen im Blut können spezifische Antigene (Agglutinogene A und B) enthalten. Antikörper (Agglutinine α und β) können im Blutplasma nachgewiesen werden. Kombinationen von Antigenen und Antikörpern ermöglichen die Klassifizierung von Blutgruppen nach dem AB0-System.

Kombinationen der Agglutinationsreaktion

Andere Arten von Blutgruppensystemen wählen nur das Vorhandensein von Antigenen in den Erythrozyten. Antikörper gegen sie treten normalerweise auf, wenn der Empfänger ein unangemessenes Blut erhält, eine immunologische Unverträglichkeit zwischen der Blutgruppe einer schwangeren Frau und dem Fötus.

Nach dem AB0-System werden alle Personen in folgende Gruppen eingeteilt:

  • Die erste 0 (I) (Blutgruppe 1) - es gibt keine Antigene in den roten Blutkörperchen und Serumagglutinine & agr; und & bgr; werden nachgewiesen
  • Das zweite A (II) - enthält in seiner Zusammensetzung Agglutinogen A
  • Drittes B (III) (3. Blutgruppe) - Agglutinogen B ist vorhanden
  • Vierte AB (IV) - Erythrozytenagglutinogene A und B sind miteinander fixiert

Das AB0-System ermöglicht es, die gefährlichen Folgen einer unsachgemäßen Bluttransfusion zu vermeiden. Für eine perfekte Blutverträglichkeit ist es erforderlich, dass das Blut des Spenders im AB0-System der gleichen Gruppe entspricht wie das Blut des Patienten. Die Transfusion einer fremden Blutgruppe kann eine immunologische Inkompatibilität verursachen und zu Transfusionskomplikationen führen. Vor der Bluttransfusion muss die Blutzusammensetzung untersucht und eine Reihe von Verträglichkeitstests durchgeführt werden.

Laborkomponenten

Um die Art der Blutgruppe zu bestimmen, bedarf der Patient keiner besonderen Schulung, es ist lediglich erforderlich, auf Alkohol zu verzichten und am Vorabend der Analyse keine Drogen zu nehmen.

Sie nehmen eine Überweisung von einem Arzt ins Labor. Es ist empfehlenswert, ein Einmal-Blutentnahmekit oder eine Einmalspritze im Voraus zu erwerben - dies schützt zuverlässig vor möglichen Infektionen während des Probenahmeprozesses. Die Blutentnahme erfolgt über einen Finger oder eine Vene. Bei einem Säugling wird normalerweise Blut aus der Ferse entnommen.

Die Grundlage für die Bestimmung der Blutart ist die Agglutinationsreaktion unter Bildung von Flocken zusammengeklebter roter Blutkörperchen. Das Laborblut-Testkit enthält Standardseren und rote Blutkörperchen in Form einer Lösung, Kontrollreagenzien, Kochsalzlösung (0,9% Natriumchlorid) und spezielle weiße Kunststoff- oder Porzellanteller sowie Pipetten.

Bluttest-Kit

Für ein zuverlässiges Ergebnis der Blutuntersuchung sollte das Labor eine Lufttemperatur zwischen 21 und 24 ° C und helles Licht haben. Alle Verbrauchsmaterialkomponenten müssen auf Übereinstimmung mit einer einzelnen Serie, Nutzungsbedingungen und Lagerbedingungen überprüft werden. Das Vorhandensein von Suspension, Sediment, Trübung in roten Blutkörperchen und Serum ist nicht akzeptabel.

Bestimmung von Seren

Auf der weißen Platte ist die Reihenfolge der Namen der Blutgruppen 0, A, B vermerkt: Auf die Platte werden große Tropfen des Standardserums der Gruppen 0 (I), A (II), B (III) gegenüber ihrer Inschrift und neben dem Serum einer anderen Serie aufgetragen: Es werden zwei Reihen erhalten Tropfen.

Durch die Verwendung unterschiedlicher Reagenzienreihen werden Fehler beseitigt. Jeder Tropfen Standardserum wird vorsichtig mit einem kleinen Tropfen Patientenblut gemischt. Alle Manipulationen werden mit einer Pipette oder einem Glasstab durchgeführt. Anschließend wird die Platte leicht geschüttelt und das Testergebnis in jedem Tropfen ausgewertet. Wenn sich innerhalb von fünf Minuten Flocken von agglutinierten Erythrozyten bilden, wird das Ergebnis als positiv gewertet.

Um mögliche Fehler auszuschließen, wird jeder Tropfen Blut auf dem Teller mit einem Tropfen Kochsalzlösung gemischt und weitere fünf Minuten gewartet. Wenn sich die Flocken in allen Tropfen abzusetzen beginnen, wird die Reaktion überwacht, indem das Testblut und eine Standardlösung von Serum AB (IV) gemischt werden. Im letzteren Fall sollte keine Erythrozytenverklebung aufgezeichnet werden.

Platte mit Serum

Bestimmung der Blutgruppe anhand der Ergebnisse:

  • Die erste Gruppe - in keinem der Tröpfchen - klebte die roten Blutkörperchen
  • Die zweite (2) Blutgruppe ist eine positive Blutreaktion mit Seren der Gruppen 0 (I) und B (III).
  • Die dritte Gruppe - Blutagglutination mit Standardseren 0 (I) und A (II)
  • Die vierte (4) Blutgruppe ist ein positives Ergebnis in drei Tropfen und ein negatives Ergebnis mit Kontroll-AB (IV) -Serum.

Es gibt einen Kreuzweg, um die Art des Plasmas zu bestimmen, wobei zusätzlich Standard-Erythrozyten verwendet werden. Diese Methode zur Bestimmung der Blutgruppe hilft bei der Identifizierung der Plasmagruppen-Antikörper α und β und eröffnet einen vollständigeren Bluttest. Wenden Sie die Kreuzmethode vor der Bluttransfusion an. Die Probenahme von venösem Blut erfolgt vorab, es wird verteidigt und das Plasma von den gebildeten Elementen getrennt.

Manchmal werden anstelle von Standardseren Lösungen von Zoliklon mit monoklonalen Antikörpern verwendet. Erhalten Sie sie unter Beteiligung gentechnischer Technologien.

Bei der Bestimmung der Blutgruppe durch die Zyklone ist das Qualifikationsniveau des medizinischen Personals, seine Genauigkeit und Aufmerksamkeit sehr wichtig. Ein fehlerhaftes Ergebnis kann durch die falsche Reihenfolge des Aufbringens von Reagenzien, die Verwendung kontaminierter oder feuchter Pipetten, ungeeignete Reagenzien und die Vernachlässigung einer Kontrollstudie hervorgerufen werden.

Seltenheit der Ergebnisse

Bei der Analyse medizinischer Statistiken stellt sich heraus, dass die erste Blutgruppe die häufigste ist - bis zu 65% der gesamten Bevölkerung der Erde. Es folgt die zweite mit einem Ergebnis von 25% und die dritte (ca. 8% der Bevölkerung). Das seltenste Ergebnis bei der Bestimmung von Blutgruppen ist die vierte Gruppe, insbesondere mit einem negativen Rh-Faktor.

Die Ergebnisse der Blutgruppenbestimmung werden vom behandelnden Arzt, der die Analyse durchgeführt hat, in einem ambulanten Ausweis oder Personalausweis (Reisepass) festgehalten. Vergewissern Sie sich, dass Sie das Datum der Studie und die Unterschrift des verantwortlichen Arztes eingeben.

Medizinische Sekundarausbildung

LAGODICH Leonty G., Chirurg

BESTIMMUNG DER BLUTGRUPPE NACH STANDARDREIHEN

Über die Manipulationstechnik

"Bestimmung der Blutgruppe mit

Seren (nach ABO-System)

2-79 01 01 "Medizingeschäft",

2-79 01 31 "Krankenpflege"

Blutgruppe mit

Seren (nach ABO-System)

Indikationen: Notwendigkeit einer Bluttransfusion, Vorbereitung auf die Operation.

1) zwei Serien von Standard-Hämagglutinationsseren in speziellen Racks;

2) eine Flasche isotonische Natriumchloridlösung;

3) markierte Tabletten;

4) Objektträger (Glasstäbe);

5) Pipette zur Blutentnahme;

6) Pipetten für isotonische Lösung;

7) Sanduhr für 5 Minuten;

9) geregeltes Desinfektionsmittel.
Die Blutgruppe wird in einem Raum mit guter Beleuchtung und einer Temperatur von +15 bis +20 ° C bestimmt. Die Handhabung erfolgt mit Handschuhen. Bei Hautschäden wird die Pflegekraft von der Arbeit suspendiert. Im Falle von Blut auf der Haut oder Schleimhäuten werden nach den aktuellen Anweisungen verarbeitet.

1. Überprüfen Sie die Qualität der Standard-Hämagglutinationsseren:

1) durch Farbmarkierung;

2) Aussehen (hell, transparent);

3) die Sicherheit der Ampulle;

4) das Vorhandensein eines ordnungsgemäß gestalteten Etiketts, auf dem Blutgruppe, Titer, Verfallsdatum und Ort der Zubereitung angegeben sind;

2. Auf den Tisch legen:

1) zwei Sätze von Standard-Hämagglutinationsseren aus drei Gruppen (O, A, B) aus zwei Reihen und ein Fläschchen mit AB (IV) -Serum, wobei jedes Fläschchen eine Pipette enthalten muss;

2) Fläschchen mit isotonischer Lösung, Pipette;

3) sterile markierte Tablette;

4) Objektträger (Glasstäbe);

5) Pipette zur Blutentnahme;

6) Sanduhr;

3. Schreiben Sie den vollständigen Namen auf das Tablett Patient, Blutgruppe;

4. Tragen Sie Handschuhe.

5. Tragen Sie 1 Tropfen (0,1 ml) Standard-Hämagglutinationsseren aus drei Gruppen von zwei Reihen auf die entsprechenden Nester der Tablette auf der Tablette auf.

6. Tragen Sie 1 Tropfen Blut von einem Finger oder einem Reagenzglas mit einer Pipette in die entsprechende Zelle auf.

7. In jedes Nest der Tablette neben dem Serum 1 Tropfen (0,1 ml) des Testbluts in das Blut: Reagenz-Verhältnis –1: 10 (Blut aus einem großen Tropfen mit verschiedenen Glasstäben entnehmen) geben;

8. Mischen Sie das Blut mit dem Reagenz, nachdem Sie die Tablette gemischt haben, und schütteln Sie sie vorsichtig in den Händen. 1 Tropfen 0,9% ige Natriumchloridlösung zu dem Serumtropfen mit den roten Blutkörperchen geben, wo eine Agglutination auftrat, jedoch nicht früher als nach 3 Minuten;

9. Auswertung des Ergebnisses 5 Minuten nach Reaktionsbeginn:

1) Die Agglutinationsreaktion kann positiv und negativ sein.

2) Wenn das Serum eine positive Reaktion ergab, bedeutet dies, dass das Blut sowohl Agglutinogen AB enthält. In diesem Fall sollte eine zusätzliche Kontrollstudie mit Standardserum der AB (IV) -Gruppe durchgeführt werden.

10. Desinfizieren Sie das Abfallmaterial.

Blutgruppenbestimmung mit Standardseren

Technik zur Bestimmung der Blutgruppe des AB0-Systems mit Standardseren

Indikationen: Notwendigkeit einer Bluttransfusion, Vorbereitung auf die Operation.

Vorbereiten: Eine Standardplatte mit Rillen, ein Satz Glasstäbchen, eine isotonische Natriumchloridlösung, ein Satz Hämagglutinationsseren 1,2,3,4 Gruppen von zwei Reihen, eine Pipette, ein aus einer Vene oder einem Finger entnommenes Testblut; Uhr; Tabletts; Handschuhe; Behälter für Abfallmaterial; Desinfektionsmittelbehälter.

Vorbereitung für die Manipulation:

  1. Die Krankenschwester ist vollständig auf die Manipulation vorbereitet: Anzug, Maske, Handschuhe, Mütze, ausziehbare Schuhe.
  2. Überprüfen Sie die Qualität von Standard-Hämagglutinationsseren durch: Farbmarkierung, Aussehen (hell, transparent); Sicherheit der Verpackung, Vorhandensein eines ordnungsgemäß gestalteten Etiketts.
  3. Bereiten Sie alles vor, was Sie zur Durchführung der Manipulation benötigen.

Durchführung der Manipulation:

Auf eine weiße Platte je nach Bezeichnung einen Tropfen Serum 1, 2, 3 Gruppen zu je zwei Serien auftragen. Jede Pipette wurde sofort in dieselbe Ampulle (Ampulle) getaucht, aus der sie entnommen wurden.

Mit einem Glasstab tropfenweise neben den Vertiefungen (6 Vertiefungen) das Testblut auftragen. Ein Tropfen Blut sollte zehnmal weniger sein als ein Tropfen Serum.

Markieren Sie die Zeit und mischen Sie mit einem sauberen, trockenen Glasstab das Blut mit 1 g Serum und anschließend mit einem weiteren 2 g Stick. usw. in allen Vertiefungen;

Wenn die Agglutination auftritt, jedoch nicht früher als 3 Minuten, werden die Tropfen der isotonischen Natriumchloridlösung zu den Tropfen gegeben, in denen die Agglutinationsreaktion auftritt, um eine falsche Agglutination zu beseitigen und die Überwachung 5 Minuten lang fortzusetzen.

Ergebnis:

a) Im Falle einer positiven Reaktion erscheinen die kleinsten Körner, die aus geklebten roten Blutkörperchen bestehen, in der Mischung in der Mischung. Kleine Körner verschmelzen zu großen Körnern und manchmal zu Flocken, während sich die Molke verfärbt.

b) bei einer negativen Reaktion bleibt die Flüssigkeit gleichmäßig rosa gefärbt;

c) 4 Kombinationen von positiven und negativen Reaktionen sind möglich:

1. Wenn sich die Agglutination in keiner der Zellen befindet, dann das Blut der I (0) -Gruppe.

2. Wenn sich die Agglutination in der ersten und dritten Zelle befindet, dann das Blut der II (A) -Gruppe.

3. Wenn die Agglutination in der ersten und zweiten Gruppe liegt, dann das Blut der III (B) Gruppe.

4. Befindet sich die Agglutination in der ersten, zweiten und dritten Zelle, so ist das Blut der IV (AB) -Gruppe.

Um Fehler auszuschließen, wird Blut mit einem Serum von 4 Gruppen überprüft, wobei eine Agglutination nicht erfolgen sollte.

Ende der Manipulation:

  1. Ziehen Sie die Handschuhe aus und legen Sie sie in eine Desinfektionslösung.
  2. Hände waschen, Handtuch trocknen.

Hinweis: Die Bestimmung der Blutgruppe erfolgt in einem gut beleuchteten Raum bei einer Temperatur von 15 - 25 ° C.

№ 11

Blutgruppenbestimmung mit Standard-Isohämagglutinationsseren

Ausrüstung: eine Reihe von Standard-Isohämagglutinationsseren von I-IV-Blutgruppen aus zwei verschiedenen Reihen, weiße Porzellantabletten oder emaillierte Tabletten mit benetzbarer Oberfläche, auf denen 8 (oder 7) Löcher markiert sind, die mit 0 (I), A (II), B (III) gekennzeichnet sind, AB (IV), 0,9% ige Natriumchloridlösung, Pipetten, Glasstäbe.

Technikleistung. Das Verfahren wird in einem gut beleuchteten Raum bei einer Lufttemperatur von 15 bis 25 ° C durchgeführt. Auf die Tablette unter dem entsprechenden Etikett Serum I, II, III Blutgruppen in Volumen geben

0,1 ml. Blut von einem Patienten wird einem Finger oder einer Vene entnommen und entsprechend zugegeben

0,01 ml (kleiner Tropfen) zum Serum. Blut und Serum werden mit Glasstäbchen gemischt. Warten auf die Hämagglutinationsreaktion 0,5-5 Minuten. In diesen Tropfen, in denen eine Agglutination auftrat, wird 1 Tropfen isotonische Lösung hinzugefügt. Danach werden die Ergebnisse der Probe gemäß dem nachstehenden Diagramm berücksichtigt.

Abb. 61. Das Schema zur Aufzeichnung der Ergebnisse der Probe bei der Bestimmung der Blutgruppe unter Verwendung eines Satzes von Standardseren. Das Diagramm zeigt: + Agglutination, - es gibt keine Agglutination.

Bitte beachten Sie, dass der Test mit der Serum-IV-Gruppe (die keine Agglutinogene enthält) nur durchgeführt wird, wenn in allen drei Vertiefungen auf der Platte eine Agglutination vorliegt, um die Bestimmung der Gruppe IV durch Ausschluss einer unspezifischen Agglutination zu bestätigen.

Abb. 62. Das Aussehen einer emaillierten Tablette, die der Blutgruppe B (III) entspricht.

Konzept der Blutgruppen

Blutgruppen des AB0-Systems

Blutgruppen des AB0-Systems wurden 1900 von K. Landsteiner entdeckt, der Erythrozyten einiger Individuen mit Blutserum anderer Individuen mischte. Er entdeckte, dass bei einigen Kombinationen das Blut koaguliert und Flocken bildet (Agglutinationsreaktion), während andere dies nicht tun. Basierend auf diesen Studien teilte Landsteiner das Blut aller Menschen in drei Gruppen ein: A, B und C. 1907 wurde eine andere Blutgruppe entdeckt.

Es wurde festgestellt, dass die Agglutinationsreaktion beim Verkleben von Antigenen einer Blutgruppe (sie wurden Agglutinogene genannt) auftritt, die in Erythrozyten mit Antikörpern einer anderen Gruppe (sie wurden Agglutinine genannt) gefunden werden, die sich im plasmaflüssigen Teil des Blutes befinden. Die Aufteilung des Blutes im AB0-System in vier Gruppen basiert auf der Tatsache, dass das Blut Antigene (Agglutinogene) A und B sowie Antikörper (Agglutinine) α (Alpha oder Anti-A) und β (Beta oder Anti-B) enthalten kann oder nicht..

Erste Blutgruppe - 0 (I)

Gruppe I - enthält keine Agglutinogene (Antigene), aber Agglutinine (Antikörper) α und β. Es ist mit 0 (i) bezeichnet. Da diese Gruppe keine Fremdpartikel (Antigene) enthält, kann sie auf alle Personen übertragen werden. Eine Person mit einer solchen Blutgruppe ist ein universeller Spender.

Die zweite Blutgruppe A β (II)

Gruppe II enthält Agglutinogen (Antigen) A und Agglutinin β (Antikörper gegen Agglutinogen B). Daher kann es nur auf diejenigen Gruppen gegossen werden, die kein Antigen B enthalten - dies sind die Gruppen I und II.

Die dritte Gruppe von Blut Вα (III)

Gruppe III enthält Agglutinogen (Antigen) B und Agglutinin α (Antikörper gegen Agglutinogen A). Daher kann es nur auf diejenigen Gruppen gegossen werden, die kein Antigen A enthalten - dies sind die Gruppen I und III.

Vierte Blutgruppe AB0 (IV)

Blutgruppe IV enthält Agglutinogene (Antigene) A und B, enthält jedoch Agglutinine (Antikörper). Daher kann es nur an diejenigen übertragen werden, die die gleiche, die vierte Blutgruppe haben. Da es jedoch keine Antikörper im Blut solcher Personen gibt, die in der Lage sind, an von außen eingebrachten Antikörpern festzuhalten, können sie Blut von jeder Gruppe erhalten. Menschen mit der vierten Blutgruppe sind universelle Empfänger.

Blutgruppen von ABO

Methode zur Bestimmung von Blutgruppen

Die Gruppenzugehörigkeit von Blut im ABO-System wird durch die Agglutinationsreaktion bestimmt. Derzeit gibt es drei Möglichkeiten, Blutgruppen mit dem ABO-System zu bestimmen:

- für Standard-Isohämagglutinationsseren;

- unter Verwendung monoklonaler Antikörper (Polyklone anti-A und anti-B).

Blutgruppenbestimmung mit Standard-Isohämagglutinationsseren

Die Essenz des Verfahrens ist auf den Nachweis der Gruppenantigene A und B im Testblut unter Verwendung von Standardseren reduziert. Zu diesen Zwecken erfolgt die Reaktion der Agglutination. Die Probe sollte in einem Raum mit guter Beleuchtung bei einer Temperatur von 15-25 ° C durchgeführt werden.

Zur Durchführung der Tests sind erforderlich: - Standard-Isohämagglutinationsseren der Gruppen O (I), A (II), B (III) und AB (IV) zweier verschiedener Serien. Serum zur Bestimmung von Blutgruppen wird aus Blutspenden in Speziallabors hergestellt. Molke im Kühlschrank bei einer Temperatur von 4 - 8 ° C lagern. Die Haltbarkeit von Molke ist auf dem Etikett angegeben. Das Etikett gibt auch den Titer an (die maximale Serumverdünnung, bei der die Agglutinationsreaktion auftreten kann), der nicht unter 1: 32 liegen sollte (für Serum B (III) - nicht unter 1:16 / 32). Das Serum sollte transparent sein und keine Anzeichen von Fäulnis aufweisen. Zur Vereinfachung sind Standardseren in einer bestimmten Farbe eingefärbt: O (I) - farblos (grau), A (II) - blau, B (III) - rot, AB (IV) - hellgelb. Diese Farben sind auf allen Etiketten von Blutprodukten mit Gruppenzugehörigkeit (Blut, rote Blutkörperchen, Plasma usw.) enthalten.

- Weiße Porzellanteller oder emaillierte Teller oder andere Teller mit benetzter Oberfläche, gekennzeichnet nach Blutgruppen.

- Isotonische Natriumchloridlösung.

- Nadeln, Pipetten, Glasstäbe (Objektträger).

Die Technik der Reaktion.

1. Unter den entsprechenden Bezeichnungen der Blutgruppe wird Serum der I-, II-, III-Gruppen in einem Volumen von 0,1 ml (ein großer Tropfen mit einem Durchmesser von ca. 1 cm) auf die Platte (Platte) aufgetragen. Um Fehler zu vermeiden, setzen Sie zwei Serien von Seren ein, da eine der Serien möglicherweise eine geringe Aktivität aufweist und keine klare Agglutination ergibt. Es ergeben sich also 6 Tropfen, wobei zwei Reihen mit drei Tropfen in der folgenden Reihenfolge von links nach rechts gebildet werden: 0 (I), A (II), B (III).

2. Blut für Forschungszwecke aus dem Finger oder der Vene. Trockener Glasstab auf einer Platte in 6 Punkten 6 Tropfen Testblut, ungefähr die Größe eines Stecknadelkopfes von 0,01 ml (kleiner Tropfen), jeweils neben einen Tropfen Standardserum geben. Darüber hinaus sollte die Serummenge das 10-fache der getesteten Blutmenge betragen. Dann werden sie vorsichtig mit Glasstäben mit abgerundeten Kanten gemischt.

Eine einfachere Technik ist ebenfalls möglich: Ein großer Tropfen Blut wird auf die Platte aufgetragen, dann wird es von der Ecke des Objektträgers entnommen und jeder Tropfen Serum wird übertragen, wobei es vorsichtig mit letzterem gemischt wird. In diesem Fall wird das Blut jedes Mal mit einer sauberen Ecke des Glases entnommen, um sicherzustellen, dass sich die Tröpfchen nicht vermischen.

3. Nach dem Mischen der Tropfen wird die Platte in regelmäßigen Abständen gewackelt. Die Agglutination beginnt innerhalb der ersten 10-30 Sekunden. Die Beobachtung sollte jedoch mindestens 5 Minuten dauern, da eine spätere Agglutination beispielsweise mit Erythrozyten der Gruppe A möglich ist2 (Ii)

4. In den Tropfen, in denen die Reaktion stattgefunden hat, wird ein Tropfen isotonische Natriumchloridlösung zugesetzt, und die Ergebnisse der Reaktion werden bewertet.

Der Agglutinationstest kann positiv oder negativ sein.

Bei einer positiven Reaktion sind innerhalb der ersten 10 bis 30 Sekunden kleine rote Kerne (Agglutinate), die aus geklebten roten Blutkörperchen bestehen, in der Mischung mit dem bloßen Auge sichtbar. Kleine Körner verschmelzen allmählich zu größeren Körnern oder sogar zu unregelmäßig geformten Flocken. Bei einer negativen Reaktion bleibt der Tropfen gleichmäßig rot.

Die Ergebnisse der Reaktionen der beiden Reihen in den Tropfen mit dem Serum der gleichen Gruppe sollten gleich sein.

Die Zugehörigkeit des Testbluts zur entsprechenden Gruppe wird durch die Anwesenheit oder Abwesenheit von Agglutination durch Reaktion mit den entsprechenden Seren bestimmt.

Wenn alle Seren positiv reagiert haben, enthält das Testblut beide Agglutinogene A und B. In solchen Fällen sollte jedoch eine zusätzliche Kontrolluntersuchung des Testbluts mit Standardserum AB (IV) durchgeführt werden, um eine unspezifische Agglutinationsreaktion auszuschließen.

Blutgruppe mit monoklonalen Antikörpern

Um auf diese Weise die Blutgruppe zu bestimmen, werden monoklonale Antikörper verwendet, die mittels Hybridom-Biotechnologie gewonnen werden.

Ein Hybridom ist ein zellulärer Hybrid, der durch Fusion einer Knochenmarkszelle (Myelom) mit einem Immunlymphozyten gebildet wird, der spezifische monoklonale Antikörper synthetisiert. Hybridom hat die Fähigkeit, auf unbestimmte Zeit zu wachsen, ist charakteristisch für eine Tumorzelle und die Fähigkeit, Antikörper zu synthetisieren, die in einem Lymphozyten enthalten sind.

Es wurden Standardreagenzien für monoklonale Antikörper (MCA) entwickelt: Anti-A- und Anti-B-Polyklone, die zur Bestimmung von Erythrozytenagglutinogenen verwendet werden. Die Zyklone sind ein lyophilisiertes Pulver mit roter (Anti-A) und blauer (Anti-B) Farbe, das unmittelbar vor der Probe mit einer isotonischen Natriumchloridlösung verdünnt wird.

Anti-A- und Anti-B-Polyklone werden in einem großen Tropfen (0,1 ml) unter den entsprechenden Aufschriften auf eine weiße Platte aufgetragen: Anti-A oder Anti-B. Neben den Antikörpertropfen sollte ein kleiner Tropfen des Testbluts aufgetragen werden. Beobachten Sie nach dem Mischen der Komponenten die Agglutinationsreaktion für 2-3 Minuten. Die Auswertung der Ergebnisse ist sehr einfach.

Die Bestimmung der Blutgruppenmitgliedschaft kann mit Fehlern einhergehen, die zu einer falschen Interpretation der Ergebnisse führen. Es gibt drei Hauptgruppen von Fehlern: Fehler im Zusammenhang mit Reagenzien geringer Qualität; technische Fehler; Fehler im Zusammenhang mit Merkmalen Schema zur Bewertung der Ergebnisse der Bestimmung von Blutgruppen mit Hilfe von monoklonalen Antikörpern (Anti-A- und Anti-B-Polyklone) des untersuchten Blutes. Die ersten beiden können vermieden werden, indem die obigen Anforderungen an Serum, Reaktionsbedingungen usw. strikt eingehalten werden. Die dritte Gruppe ist mit dem Phänomen der unspezifischen Panagglutination (Thomsen-Phänomen) verbunden, bei dem das Serum bei Raumtemperatur mit allen roten Blutkörperchen agglutiniert, auch mit mit eigenen (Autoagglutination) und roten Blutkörperchen agglutinieren gleichzeitig mit allen Seren, auch mit Serum der AB-Gruppe. Ein ähnliches Phänomen wurde bei einer Reihe von Krankheiten beschrieben: Blutkrankheiten, Splenomegalie, Leberzirrhose, Infektionskrankheiten usw. Panagglutination und Autoagglutination bei gesunden Menschen werden ebenfalls beschrieben.

Das Phänomen der Panagglutination und Autoagglutination wird nur bei Raumtemperatur beobachtet. Wird die Definition von Gruppenmitgliedschaften bei einer Temperatur von 37 ° C vorgenommen, verschwinden diese.

Es ist unbedingt zu beachten, dass in allen Fällen von unscharfen oder zweifelhaften Ergebnissen die Blutgruppenbestimmung unter Verwendung von Standardseren aus anderen Serien sowie im Querschnitt wiederholt werden sollte.

Standard der Handlungen der Krankenschwester zur Bestimmung der Blutgruppe für das ABO-System

- Tragen Sie auf der Platte zur Bestimmung der Blutgruppe von links nach rechts die Serumgruppen 0 αß (I), Аß (II), Вα (III) und in die Ecke des vollständigen Namens des Patienten ein.

- In zwei Reihen mit jeweils drei großen Tropfen werden die Signaturen auf der Platte von links nach rechts mit Standardserum 0 αß (I), Аß (II), Bα (III) (0,1 ml) versehen. Jedes Serum wird mit einer separaten Pipette aufgetragen (häufig Augenpipetten verwenden).

- Neben jedem Tropfen Serum mit einem Stift (oder einer separaten Pipette) wird das Testblut in einem kleinen Tropfen (0,01 ml) aufgetragen.

- Das Verhältnis "Serum: Blut" sollte 10: 1 betragen.

(Ein Tropfen Standard-Serum sollte ungefähr einer Penny-Münze entsprechen, ein Tropfen Blut = Kopf der Schneidernadel)

- Die Tropfen werden gründlich mit Stäbchen gemischt (jeder Tropfen ist ein separates Stäbchen, der Winkel des Objektträgers). Die Beobachtung der Reaktion erfolgt mit einer leichten Schaukelplatte.

- Nach 3 Minuten (jedoch nicht früher) wird in den Tropfen, in denen eine Agglutination von Erythrozyten auftrat, ein Tropfen (0,05 ml) isotonische Natriumchloridlösung zugegeben, und die Beobachtung wird fortgesetzt, während die Platten geschaukelt werden. Nach einer physiologischen Lösung verschwindet die falsche Agglutination, die wahre bleibt unverändert oder nimmt zu.

- Die gesamte Reaktionsbeobachtungszeit beträgt 5 Minuten.

Diese Bewertungsergebnisse der Reaktion mit Standard-Isohämagglutiniruyuschimi-Seren:

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